معلومة

4.2: تقنيات التلوين البكتيري المتخصصة - علم الأحياء

4.2: تقنيات التلوين البكتيري المتخصصة - علم الأحياء


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

نتائج التعلم

  • صف الغرض من كل من البقع المدرجة: بسيطة ، جرام ، حمض سريع ، Endospore ، كبسولة ، فلاجيلا ، سبروشيتي.
  • تعرف على الخصائص الخلوية التي كشفت عنها كل من البقع المدرجة

بسيط صبغات:

الأصباغ شائعة الاستخدام للبقع البسيطة: الكريستال البنفسجي ، الميثيلين الأزرق ، سافرانين

  • يستخدم صبغة واحدة
  • يستخدم لتوفير لون لخلايا بكتيرية شفافة
  • يمكن استخدامها لتحديد حجم الخلية وتشكلها وترتيبها
  • جميع البكتيريا لها نفس اللون عند تلطيخها بصبغة واحدة يتم استخدامها

الصورة 1: لطخة بسيطة مع كريستال بنفسجي تظهر بكتيريا على شكل قضيب. لاحظ أن جميع البكتيريا لها نفس لون الصبغة ، البنفسجي الكريستالي (البنفسجي) ، بغض النظر عن تكوين جدار الخلية. صورة منتصر دو ، 2007 (https://commons.wikimedia.org/wiki/F...micrograph.jpg)

غرام وصمة عار

وصمة عار أساسية - كريستال بنفسجي

لاذع - اليود. مزيل اللون- 95٪ إيثانول

مضاد - Safranin

  • وصمة عار تفاضلية مشتركة
  • يعكس تفاعل الجرام (إيجابي أو سلبي) خصائص جدار الخلية
  • تستخدم أيضًا لتحديد حجم الخلية وتشكلها وترتيبها

الصورة 2. إيجابية الجرام ، قضيب ، العصوية الرقيقة. (آن سي سميث ، جامعة ماريلاند ، كوليدج بارك ، دكتوراه في الطب)

الصورة 3: صبغة جرام تظهر قضبان سالبة الجرام (وردية) وكوتشي موجب الجرام (أرجواني): https://commons.wikimedia.org/wiki/F...m_stain_01.jpg

وصمة عار حامضي

البقعة المقاومة للأحماض هي بقعة تفاضلية تُستخدم لتحديد الكائنات الحية سريعة التحمل مثل أعضاء الجنس المتفطرة .

تتميز الكائنات الحية الصامدة للأحماض بجدران خلوية شبيهة بالشمع شبه غير منفذة ؛ تحتوي على حمض الميكوليك وكميات كبيرة من الأحماض الدهنية والشموع والدهون المعقدة. تتميز الكائنات الحية سريعة التحمل بمقاومة عالية للمطهرات والظروف الجافة. (1)

نظرًا لأن جدار الخلية مقاوم جدًا لمعظم المركبات ، فإن الكائنات الحية سريعة التحمل تتطلب تقنية تلطيخ خاصة. البقعة الأساسية المستخدمة في التلوين السريع للحمض ، carbolfuchsin ، قابلة للذوبان في الدهون وتحتوي على الفينول ، مما يساعد البقعة على اختراق جدار الخلية. يساعد هذا أيضًا عن طريق إضافة الحرارة. يتم بعد ذلك شطف اللطاخة بمزيل لون قوي جدًا ، والذي يزيل البقعة من جميع الخلايا غير سريعة الحموضة ولكنه لا يتخلل جدار الخلية للكائنات سريعة التحمل. ثم تأخذ الخلايا غير الحامضية التي أزيلت لونها الصبغة المضادة. (1)

وصمة عار أساسية - Carbol fuchsin

مزيل اللون - كحول حامض

مضاد - أزرق الميثيلين

  • صبغة تفاضلية تستخدم للكشف عن البكتيريا بجدران خلايا حمض الميكوليك (أجناس المتفطرة و نوكارديا)
  • تم تطويره لاكتشاف الأنواع البكتيرية المسببة لمرض السل
  • تقاوم الكائنات الحية سريعة التحمل إزالة اللون باستخدام الكحول الحمضي

صورة 4. ثقافة مختلطة المتفطرة smegmatus (سريع الحموضة ، أحمر / وردي) و المكورات العنقودية البشروية (غير سريع الحموضة ، أزرق فاتح / أرجواني). (آلان شنكل ، وبيتر جاستيس ، وإريكا سوشمان ، جامعة ولاية كولورادو ، فورت كولينز ، كولورادو)

وصمة عار

تُستخدم هذه البقعة لتصور الأبواغ البكتيرية التي ينتجها أعضاء من الأجناس عصية و المطثية. تجعل طبيعة الجراثيم منيعًا لمعظم البقع العادية وطرق التلوين ، ولكن بمجرد تلطيخها ، فإنها تقاوم بشدة إزالة اللون والتلوين المضاد. في ال شيفر فولتون الطريقة ، وصمة عار أولية مع الأخضر الملكيت يتم دفعها إلى داخل البوغ عن طريق تبخير المستحلب البكتيري. أخضر الملكيت قابل للذوبان في الماء وله تقارب منخفض للمواد الخلوية ، لذلك يمكن إزالة لون الخلايا النباتية (التي تنقسم بنشاط) بالماء. ثم تتم مقاومة الخلايا الخضرية بالسافرانين. سيكشف الفحص المجهري للأبواغ الملطخة عن حجمها النسبي وموقعها في الخلية ، وهي خصائص مميزة لكل نوع من الأنواع المكونة للبوغ.

وصمة عار أولية - أخضر ملاكيت

مضاد - سافرانين

  • الإندوسبورات تقاوم البقع الأساسية
  • وصمة عار الإندوسبورات باللون الأخضر الملكيت ؛ تلطخ الخلايا النباتية بالسافرانين (أحمر)

صورة 5. بقعة Endospore من أ بكتيريا سيريوس العصويه الثقافة باستخدام طريقة Shaeffer-Fulton ومشاهدتها بتكبير إجمالي 1000x تحت عدسة الغمر بالزيت. الخلايا الخضرية B. cereus باللون الأحمر الأبواغ باللون الأخضر. بسبب عمر الثقافة ، تم إطلاق الإندوسبورات من الخلايا. (Derek Weber and S. Finazzo، Broward Community College - Central Campus، Davie، FL)

صبغة الكبسولة (تلطيخ سلبي)

من الصعب عمومًا تلطيخ كبسولات السكاريد وطبقات السلايم بشكل انتقائي. بدلاً من ذلك ، يتم إظهارها ببساطة عن طريق تحديدها ، وتلطيخ الخلفية و / أو الخلايا دون تلطيخ الكبسولة. هذه وصمة عار سلبية يمكن القيام به بعدة طرق. تم تحضير شريحة العرض التوضيحي للمختبر عن طريق تلطيخ الخلفية والخلايا باستخدام fuchsin الأساسي. ومن ثم ، تظهر الكبسولة كمنطقة واضحة أو هالة تحيط بالخلية الحمراء على خلفية حمراء.

يستخدم صبغة حمضية: (أحمر كونغو أو نيجروزين) وصمة عار أساسية: (بنفسجي كريستالي أو سافرانين)

  • البقع السلبية ليست مثبتة بالحرارة ولا مغسولة
  • خلفية الشريحة ملطخة ببقع حمضية (تظل الكبسولة غير ملطخة)
  • الخلايا الموجودة داخل الكبسولة ملطخة بالبقع الأساسية
  • أمثلة على الخلايا المغلفة: عصيات الجمرة الخبيثة, العقدية الرئوية، و الالتهاب الرئوي كليبسيلا

صورة 6: مغلفة الهوائيات المعوية ملطخة بصبغة كبسولة أنتوني. (غاري إي كايزر ، كلية المجتمع في مقاطعة بالتيمور ، حرم كاتونسفيل الجامعي ، بالتيمور ، ماريلاند)

بقعة فلاجيلا

تقوم هذه البقعة بتغطية الأسواط البكتيرية الرقيقة بالمعادن الثقيلة أو غيرها من المركبات لجعلها مرئية في المجهر الضوئي. بمجرد ظهورها ، يمكن استخدام موقع وعدد الأسواط للتشخيص. يختلف وجود الأسواط باختلاف الظروف الثقافية ، لذا فإن النتيجة السلبية ليست دليلاً على عدم قدرة الخلية على إنتاج الأسواط. تم تحضير شريحة العرض التوضيحي بمركب فضي لتغطية السوط وصبغة حمراء ، fuchsin الأساسي ، لتلطيخ الخلايا.

نترات الفضة

  • تستخدم لرؤية الأسواط البكتيرية النحيلة جدًا بحيث لا يمكن رؤيتها باستخدام تقنيات التلوين الأخرى
  • نترات الفضة تجعل الأسواط تبدو أكبر مما هي عليه
  • يمكن استخدامها لتحديد ترتيب السوط لتحديد الهوية.
    • السابق: بروتيوس فولغاريس لديه سوط صخري

الصورة 7: تألق الزائفة ملطخة بثقافات جزيرة Presque Cultella وصمة عار. تشير الأسهم في العرض المسمى إلى السوط. (جاي ميليز وطلاب علم الأحياء التمهيدي ، كلية ريد ، بورتلاند ، أوريغون)

الصورة 8: (أ) تخطيطي بكتريا قولونية السوط. الجسم القاعدي: يقع في قاعدة السوط. الجسم القاعدي ، المضمن في جدار الخلية وغشاء الخلية ، هو جهاز الإخراج. يعمل كمحرك لتوفير الطاقة للحركة. يحدد المفتاح القريب اتجاه الدوران. الخطاف: يشير هذا الهيكل بعيدًا عن الخلية مباشرةً وله منحنى حاد (حوالي 90 درجة) تبرز منه الشعيرات. الشعيرة: تبرز هذه البنية الخيطية من الخلية البكتيرية. إنه أنبوب مجوف مصنوع من بروتين فلاجيلين. تعمل مثل مروحة السفينة أو الطائرة لتحريك الخلية البكتيرية. (ب) أمثلة على ترتيب السوط البكتيري. (ج) سوط محيطي (تلطيخ سوط). تلطخ الخلية البكتيرية باللون الأحمر والسوط ملطخ باللون الأحمر الفاتح حول الخلية البكتيرية. من أطلس علم الأحياء الدقيقة الفموي ، تحرير: Xuedong Zhou and Yuqing Li ، 2015.


شاهد الفيديو: أحياء دقيقة - صبغ البكتيريا (يونيو 2022).


تعليقات:

  1. Samulkree

    المعلومات الممتعة

  2. Sagami

    أنا محدود ، أعتذر ، لكن كل هذا لا يقترب. هل هناك متغيرات أخرى؟



اكتب رسالة