معلومة

هل تتسبب المراكز اللولبية المختلفة الموجودة على الترابط في تغيرات مؤكدة وتأثيرات مختلفة في البروتينات المستهدفة؟

هل تتسبب المراكز اللولبية المختلفة الموجودة على الترابط في تغيرات مؤكدة وتأثيرات مختلفة في البروتينات المستهدفة؟


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

لنفترض أن البكتيريا المسببة للأمراض A تصنع السموم ، التي تحتوي على أحماض أمينية D بدلاً من L-amino Aids ، هل هذا الاختلاف في chirality لانى تغيير تكوين مختلف في المستقبل أو الإنزيم ، مما يؤدي إما إلى تعطيل مسار الإنزيم أو مسار تحويل الإشارة أو تنشيط مسار مختلف؟

أفهم ماهية chirality في مفهوم الكيمياء العضوية - ضوء مستقطب دوار ، نظام ingold-prelog ، إلخ ؛ ومع ذلك ، لم أتحكم أبدًا عن الميزة الهيكلية للجزيئات اللولبية التي تغير طريقة تفاعلها داخل الخلية.

لا أفهم كيف يمكن أن تترافق التغييرات في chirality مع السمية الخلوية.

الروابط: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/24752840

http://www.jomb.org/uploadfile/2014/0113/20140113053743849.pdf

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3960212/


هناك بعض الأشياء التي يجب عليك الاهتمام بها باستخدام chirality في النظم البيولوجية:

لاحظ أولاً ، أنه بالنسبة للأحماض الأمينية ، فإننا عادةً ما نستخدم L و D بدلاً من تسمية r و s.

في الكيمياء ، عادة ما يكون الاختلاف بين التماثيل المتجانسة مجرد اختلاف في استقطاب الضوء كما وصفته ، وإلا يمكن اعتبارها متطابقة ، نظرًا لأن لها خصائص كيميائية متطابقة. طريقة التفكير هذه تفعل ذلك ليس تنطبق على الكيمياء الحيوية - في اللحظة التي تشارك فيها الإنزيمات (الجزيئات الكبيرة ذات الهياكل ثلاثية الأبعاد المحددة للغاية) ، يصبح الاختلاف الهيكلي بين الشكلين مهمًا جدًا لكل تفاعل بيولوجي.

في حالة غير مرتبطة الأحماض الأمينية وهذا يعني أن الأحماض الأمينية D سامة للخلايا حقيقية النواة ، لأن تشابهها مع شكل D يسمح لها بالتفاعل مع بعض الإنزيمات التي تربطها عادة ، لكن الارتباط ليس مطابقًا تمامًا لذلك يتم تثبيط الإنزيمات ، وهو ما يجعل الشكل D سامًا. (تم وصف هذا بالفعل في الورقة الثانية التي ربطتها :)

في الدراسات التي أجريت على الحيوانات ، أدى إعطاء الأحماض الأمينية D للجرذان والصيصان إلى تثبيط النمو [18]. بالإضافة إلى ذلك ، نتجت أضرار جسيمة مثل تثبيط تخليق ترانساميناز الغلوتامات أوكسالواسيتات ، وترانساميناز الجلوتاميك بيروفيك ، ونزعة هيدروجين اللاكتات عن تراكم الأحماض الأمينية D في الأنسجة الحيوانية [18].

الآن في سؤالك أنت تسأل عن الفرق بين السم المصنوع من الأحماض الأمينية "الخاطئة". الشيء هو أن هذا التغيير في البروتين سيعني على الأرجح أنه لم يعد سمًا. سم البروتين سام لأنه يمكن أن يتفاعل مع البروتينات الأخرى ، بناءً على هيكله ثلاثي الأبعاد. يعتمد هذا الهيكل على الخصائص الكيميائية والهيكلية للأحماض الأمينية التي تبنيها. إذا قمت بتغيير البنية الأساسية لكل حمض أميني ، فسوف يتم طيها بشكل مختلف وستحصل على بروتين مختلف تمامًا - و ليس نسخة معكوسة من البروتين / السم الأصلي.


لا.

لا يمكن للمرء أن يعمم حول تأثير التغيير في chirality في يجند في البروتين الذي يرتبط به عادة. كما يوضح الرسم التخطيطي البسيط أدناه ، فيما يتعلق بالتفاعل مع موقع ربط الترابط ، لا يوجد فرق جوهري بين متماثل للرابط العادي والنسخة المعدلة منه:

على حد سواء قد تكون قادرة على التفاعل مع الموقعين "أ" و "ب" على البروتين ، ولكن ما إذا كان هذا سيكون مثبطًا أم لا - سيعتمد على طاقة التفاعل مقارنةً بتفاعل التفاعل الصحيح (والتركيزات النسبية من الركيزة والمثبط).

إذا كان ملزمًا ، فمن غير المرجح أن يتسبب في تغيير التشكل ، بل ويقل احتمال إطلاق مسار بديل. تم تصميم معظم مواقع ربط البروتين لاستجابة واحدة. في حالة حدوث اضطراب ، يكون التثبيط هو النتيجة الأكثر ترجيحًا.

بقدر ما يتعلق الأمر بالسم البكتيري ، فإن حقيقة أنه قد يستخدم الأحماض الأمينية D هي هالة حمراء. ما يهم هو الهيكل العام للسم ، وقد تطور للعمل على هدف معين. من المحتمل أن يكون كل مثال فريدًا.

سيكون لأي كتاب مدرسي للكيمياء الحيوية أقسام حول خصوصية الركيزة للأنزيمات (على سبيل المثال ، Berg وآخرون. عبر الانترنت).


كما ذكر Nicolai في إجابته ، فإن تغيير chirality (L و D) من الأحماض الأمينية سيغير بشكل جذري طريقة طي البروتين. لقد بحثت على الإنترنت لمعرفة ما إذا كانت بنية محلولة من D هي شكل من أشكال البروتين فقط. ومع ذلك ، لم يكن هناك شيء.
لكن الحمض النووي باليد اليمنى واليسرى معروفان. لا يحدث هذا الاختلاف بسبب اختلاف chirality في مكونات الحمض النووي ولكن الطريقة التي يتم بها إقران القواعد. ومع ذلك ، فإنه يوضح كيف يمكن أن يؤدي التغيير في chirality إلى تغيير غير تافه في الهيكل.

كان القائم بالتحميل الأصلي ريتشارد ويلر (Zephyris) في en.wikipedia - الأصل من en.wikipedia ؛ صفحة الوصف / كانت هنا. ، GFDL ، https://commons.wikimedia.org/w/index.php؟curid=2117121
سأقرأ المزيد عن توصيل الإشارة وأعود إلى السؤال.


خلية السيرة الذاتية ، امتحان 4 (أسئلة / إجابات اختبار)

أ.
يحتوي الترابط على موقع ربط واحد فقط للمستقبلات.

ب.
يجب أن يحتوي المستقبل على بقايا فينيل ألانين في مكان معين.

ج.
يتسبب ربط Ligand في حدوث تحول في التكوين يكشف عن موقع ملزم لمستقبل آخر.

أ.
استيعاب المستقبل

ب.
نسخ بروتينات SOCS

ج.
نزع الفسفرة من بقايا الفوسفوتيروزين

أ.
استيعاب المستقبل

ب.
نزع الفسفرة من المستقبلات

ج.
تدهور يجند

هم يعتمدون على الكالسيوم.

ينضمون إلى خلايا من نوع مماثل لبعضها البعض.

يربطون الخلايا بالطبقة التحتية.

يمكن تفكيكها بسرعة على بيئة متغيرة.

قد تعمل كنوع من البنية الحسية التي تؤدي إلى نمو الخلايا.

تم العثور عليها في خلية حيوانية فقط.

وهي تتكون من بروتين كونيكسين.

هم متخصصون في التواصل بين الخلايا.

جدار الخلية لكلتا الخليتين

الأيونات خارج الخلية أمثلة على الرسل الثاني.

إنهم يديمون سلسلة الإشارات لإحداث تأثير في الخلية.

البروتينات الصغيرة هي أمثلة على الرسل الثاني.

يتفاعلون مع بروتينات المستجيب.

هم بروتينات غشائية حصرية.

لديهم بروتين قادر على التحلل المائي GTP.

يرتبط ارتباط Ligand بنشاط GTPase.

لديهم مجال السيتوبلازم.

ادرينالين في خلايا العضلات.

أستيل كولين في خلايا العضلات.

إنتاج AMP الدوري (cAMP) في خلايا الكبد.

كل الإجابات صحيحة.

cAMP هو مثال على النيوكليوتيدات الموجودة في RNA.

أيونات cAMP و Ca2 + قابلة للتبديل في مسارات الإشارات.

cAMP هو مثال على الترابط.

يرتبط cAMP ببروتينات G.

ستكون الوحدة الفرعية α غير قادرة على الارتباط بالوحدتين الفرعيتين Gβ و Gγ.

لن يتمكن GPCR من ربط الترابط.

لن تنفصل الوحدة الفرعية α عن GPCR.

لن تتفاعل وحدتا Gβ و Gγ.

تقليل استهلاك الأكسجين.

كل الإجابات صحيحة.

هناك أكثر من 10 ملايين نسخة من البروتين في خلية قضيب.

يتم تنظيمه في أكوام من الأغشية.

لا يستجيب للرابط.

كل الإجابات صحيحة.

تستشعر خلايا القضيب الضوء بمساعدة GPCR الحساس للضوء المعروف باسم رودوبسين. يتكون Rhodopsin من بروتين opsin ، الذي يحتوي على بنية GPCR المعتادة المكونة من سبعة غشاء ، والتي ترتبط تساهميًا بصبغة ممتصة للضوء تسمى شبكية العين. رودوبسين ، الموجود فقط في الخلايا العصوية ، موضعي في الألف أو نحو ذلك من الأقراص الغشائية المسطحة التي تشكل الجزء الخارجي لكل من هذه الخلايا على شكل قضيب.


البيولوجيا الجزيئية للخلية. الطبعة الرابعة.

على عكس البروتينات الحاملة ، تشكل بروتينات القناة مسامًا محبة للماء عبر الأغشية. توجد فئة واحدة من بروتينات القناة في جميع أشكال الحيوانات تقريبًا تقاطعات الفجوة بين خليتين متجاورتين يساهم كل غشاء بلازما بالتساوي في تكوين القناة التي تربط السيتوبلازم في الخليتين. تمت مناقشة هذه القنوات في الفصل 19 ولن يتم التطرق إليها هنا مرة أخرى. كل من تقاطعات الفجوة و بورينز، البروتينات المكونة للقنوات للأغشية الخارجية للبكتيريا ، والميتوكوندريا ، والبلاستيدات الخضراء (التي تمت مناقشتها في الفصل 10) لها مسام كبيرة ومتساهلة نسبيًا ، والتي ستكون كارثية إذا ربطت بشكل مباشر داخل الخلية بالفراغ خارج الخلية. في الواقع ، العديد من السموم البكتيرية تفعل ذلك بالضبط لقتل الخلايا الأخرى (تمت مناقشته في الفصل 25).

في المقابل ، فإن معظم بروتينات القناة في غشاء البلازما للخلايا الحيوانية والنباتية التي تربط العصارة الخلوية بالجزء الخارجي للخلية بالضرورة لها مسام ضيقة انتقائية للغاية يمكن أن تفتح وتغلق. نظرًا لأن هذه البروتينات تهتم على وجه التحديد بنقل الأيونات غير العضوية ، يشار إليها باسم القنوات الأيونية. من أجل كفاءة النقل ، تتمتع القنوات بميزة على الناقلات حيث يمكن لما يصل إلى 100 مليون أيون أن تمر عبر قناة واحدة مفتوحة كل ثانية & # x02014a بمعدل 10 5 مرات أكبر من أسرع معدل نقل بوساطة أي بروتين ناقل معروف. ومع ذلك ، لا يمكن إقران القنوات بمصدر طاقة لأداء النقل النشط ، وبالتالي فإن النقل الذي تتوسطه يكون دائمًا سلبيًا (& # x0201cdownhill & # x0201d). وبالتالي ، فإن وظيفة القنوات الأيونية هي السماح لأيونات غير عضوية محددة & # x02014 بشكل أساسي Na + أو K + أو Ca 2+ أو Cl - & # x02014 لتنتشر بسرعة أسفل تدرجاتها الكهروكيميائية عبر طبقة ثنائية الدهون. كما سنرى ، فإن القدرة على التحكم في تدفقات الأيونات عبر هذه القنوات ضرورية للعديد من وظائف الخلايا. الخلايا العصبية (الخلايا العصبية) ، على وجه الخصوص ، تخصصت في استخدام القنوات الأيونية ، وسننظر في كيفية استخدامها لمجموعة متنوعة من هذه القنوات لاستقبال الإشارات وتوصيلها ونقلها.


تطوير بروابط تويوكاميسين المشتقة

الشكل 2. 5′-Hydroxyl له تأثير ضئيل على التقارب. تعتبر الذرات غير المتجانسة والكيمياء الفراغية الموضحة باللون الأحمر مهمة لتقارب HSP70 ولا يمكن استبدالها بالهيدروجين أو CH أو تغيير الكيمياء الفراغية.

تم اقتباس جميع النتائج على أنها المتوسط ​​الهندسي ± الخطأ المعياري للمتوسط ​​(SEM) لثلاث تجارب مستقلة ما لم ينص على خلاف ذلك ، pكد = −log10(كد(ميكرومتر) × 10 –6).

تم نقل جميع القيم إلى رقمين معنويين.

تم شراء جميع المركبات من الموردين التجاريين المعنيين واستخدامها دون مزيد من التنقية.

تم اقتباس جميع النتائج على أنها المتوسط ​​الهندسي ± SEM لثلاث تجارب مستقلة ما لم ينص على خلاف ذلك ، صكد = −log10(كد(ميكرومتر) × 10 –6).

تم نقل جميع القيم إلى رقمين معنويين.


تم الكشف عن تأثيرات مختلفة بشكل كبير لمضادات التتراهدروبيرروبين على مستقبلات الدوبامين D1 / D2 من خلال الدراسة التجريبية والمتكاملة في محاكاة السيليكو

تيتراهيدروبيربيروبين (TU) ، وهو مركب نشط رباعي هيدروبربررين (THPBs) ، يكتسب شعبية متزايدة كمرشح محتمل لعلاج القلق والاكتئاب. أحد اثنين من متصاهريها ، ل-TU ، تم الإبلاغ عن أنه مضاد لكل من مستقبلات D1 و D2 ، ولكن النشاط الوظيفي للمُصاهِر الآخر ، د-TU ، لا يزال غير معروف. في هذه الدراسة ، تم الجمع بين التجارب في محاكاة جزيئية سيليكو (1) لتأكيد واكتشاف الأنشطة الوظيفية لـ ل-TU و د-TU و (2) تقييم الآليات الجزيئية بشكل منهجي بعد الملاحظات التجريبية. ل- ثبت أن TU مضاد لكل من مستقبلات D1 و D2 (IC50 = 385 نانومتر و 985 نانومتر ، على التوالي) ، بينما د- لا يظهر TU أي تقارب تجاه مستقبلات D1 أو D2 ، بناءً على مقايسة cAMP (مستقبل D1) ومقايسة تدفق الكالسيوم (مستقبل D2). قدمت نتائج كل من دراسات الالتحام المرنة للرابطات والمحاكاة الديناميكية الجزيئية (MD) رؤى على المستوى الذري. ال ل- الهياكل المرتبطة بـ TU التي تنبأ بها MD (1) تخضع لدوران خارجي للحزم الحلزونية خارج الخلية (2) لها جيب ربط تقويمي موسع و (3) لها مفتاح تبديل مركزي يُمنع من الدوران بحرية. هذه الميزات فريدة من نوعها ل-TU enantiomer وتقديم تفسير لسلوكه العدائي تجاه مستقبلات D1 و D2. تقدم الدراسة الحالية نظرة جديدة على العلاقات الهيكلية والوظيفية لـ ل-TU و د-TU ملزمة لمستقبلات الدوبامين ، وتوفر إرشادات للتصميم العقلاني للجزيئات الجديدة التي تستهدف مستقبلات الدوبامين هذين في المستقبل.

هذه معاينة لمحتوى الاشتراك ، والوصول عبر مؤسستك.


توقعات - وجهات نظر

نظرًا لأهمية الارتباط الانتقائي الفراغي ببروتينات البلازما وأن ما يقرب من 50 ٪ من الأدوية التي يتم تسويقها هي من رفقاء العرق ، سيكون من المفيد للغاية تطوير في المختبر نماذج لتقييم وتوقع الصلات الملزمة والمواقع ذات الصلة. في الآونة الأخيرة ، أصبحت المجالات المؤتلفة لـ HSA ومتغيرات AGP أدوات قوية لتوضيح خصائص الارتباط الانتقائي الفراغي للأدوية اللولبية في المختبر. ومع ذلك ، هناك حاجة إلى مزيد من الدراسات لتحديد ما إذا كانت النتائج الملزمة متسقة في الجسم الحي.


4 تعدد وظائف المحور CXCR4 / CXCL12 في الصحة والأمراض

تنشيط CXCR4 متورط في العديد من الأنظمة الفسيولوجية ، من الإشارات التي يسببها CXCL12 في توجيه الخلايا الجذعية المكونة للدم والخلايا السلفية إلى نخاع العظم 108 إلى الأوعية الدموية الجديدة ، وتكوين الأوعية 109 ، وتكوين الخلايا العصبية 110 ، والاستجابات المناعية التكيفية. يتضح خلل التنظيم في شبكة CXCR4 في العديد من الأمراض بما في ذلك العدوى الفيروسية ، و 113 مرضًا خبيثًا ، و 114 مرضًا إقفاريًا ، و 7 أمراض التهابية ، و 115 حالة من أمراض المناعة الذاتية ، و 116 ونقص المناعة في الثآليل ، ونقص غاماغلوبولين الدم ، ونقص المناعة ، واضطراب متلازمة النخاع الشوكي (WHIM). 117 لذلك ، يمثل CXCR4 هدفًا علاجيًا محتملاً لأمراض متعددة. ومع ذلك ، في حين أن علم الأحياء الدقيق لـ CXCR4 يوفر نظامًا مضبوطًا بدقة يؤثر على علم وظائف الأعضاء الأساسي ، يجب أن يأخذ التدخل العلاجي في الاعتبار التأثيرات على الأنسجة المستهدفة في سياق اضطرابها في العمليات الفسيولوجية الأخرى ، من أجل تعظيم الفوائد العلاجية وتقليل الآثار خارج الهدف. ومن ثم ، فإننا نراجع بإيجاز دور CXCR4 في العمليات الفسيولوجية.

4.1 تؤثر إشارات CXCR4 على العديد من العمليات الفسيولوجية

4.1.1 تكوين الأعضاء

تلعب إشارات CXCR4 دورًا أساسيًا في تنسيق تكوين الأعضاء. تموت الفئران التي تعاني من نقص CXCR4 و CXCL12 في الفترة المحيطة بالولادة ولديها عيوب في المناعة والقلب والأوعية الدموية والدماغ نتيجة لضعف هجرة الخلايا بالإضافة إلى تكوين الدم المعيب. 107 ، 118 ، 119 على سبيل المثال ، تعد إشارات CXCR4 أمرًا بالغ الأهمية في انتقال الخلايا العصبية وتشكيل الجهاز العصبي المركزي. يتم توجيه 120 Interneurons إلى الطبقة القشرية الصحيحة عبر تدرجات CXCL12 بينما يعمل CXCR7 كمغسلة لجمع CXCL12 الزائدة. 63

4.1.2 تكون الأوعية الدموية وتكوين الأوعية الدموية الجديدة

في ظل الظروف الفسيولوجية ، تعمل أنواع مختلفة من تلف الأنسجة ، مثل نقص الأكسجة أو التشعيع أو السموم ، على تنظيم تعبير CXCL12 ، وبالتالي جذب الخلايا الجذعية CXCR4 + والعديد من العوامل الوعائية وعوامل الأوعية الدموية إلى المواقع التي تتطلب الإصلاح. 121-123 في نموذج الأرنب لمرض القلب الإقفاري ، يظهر أن تعبير CXCL12 قد تم تنظيمه بواسطة G-CSF والعامل المحفز لنقص الأكسجة 1α (HIF-1α) ، والذي بدوره يعزز توطين الخلايا التي تعبر عن CXCR4 تجاه الأنسجة القلبية ، وهو تأثير تمنعه ​​إدارة AMD3100. 124

تعد إشارات CXCR4 ضرورية لتكوين الأوعية أثناء تكوين الأورام والورم الخبيث. يتسبب نقص الأكسجة في تنظيم CXCL12 ، وبالتالي تعزيز إشارات CXCR4. 125 ينظم تنشيط CXCR4 تعبير VEGF على كل من مستوى الرنا المرسال والبروتين عبر تنشيط مسار PI3K / AKT. إشارات 126 VEGF إلى الخلايا البطانية للتعبير عن البروتينات المعدنية المصفوفة (MMP-2 و MMP-9) التي تحفز كلا من الهجرة البطانية والاندماج في هياكل شبيهة بالشعيرات الدموية ، وهما خطوتان أساسيتان في عملية تكوين الأوعية. 26 توجد شبكة ردود فعل إيجابية تحافظ على تكوين الأوعية الدموية للورم حيث يمكن للعامل VEGF أن يحفز تعبير CXCL12 و CXCR4 في الخلايا السرطانية بطريقة أوتوكرين وباراكرين. 127 علاوة على ذلك ، يعزز تحريض VEGF الغزو والورم النقيلي عن طريق زيادة مستوى التعبير والنشاط MMP. يمكّن نشاط 128 MMP الخلايا السرطانية من غزو المواقع الثانوية عن طريق ترحيل تدرجات CXCL12. 129 تمشيا مع هذه الآلية ، تحتوي المواقع الشائعة للورم الخبيث مثل الرئة واللمف والكبد على تركيزات محلية عالية من CXCL12. 130 يستدعي الدور المركزي لمحور CXCR4 / CXCL12 في الاستجابة الخلوية لنقص الأكسجة اتباع نهج حذر في الاستهداف العلاجي بحيث تتعطل العمليات الخلوية الخبيثة على عكس العمليات الخلوية المتجانسة العادية.

4.1.3 تكون اللمفاويات / تكون النخاع

يلعب CXCR4 دورًا مهمًا في تكوين الخلايا الليمفاوية للخلايا البائية وتكوين النخاع العظمي. 119 CXCL12 مرتبط بغشاء الخلية للخلايا الشبكية في جميع أنحاء النخاع العظمي. 131 ، 132 نظرًا لأن CXCR4 يتم التعبير عنه في الخلايا الجذعية المكونة للدم والخلايا الجذعية السلفية ، فإن هذه الخلايا تغرس في نخاع العظم ويتم الاحتفاظ بها هناك أثناء خضوعها لتمايز متعدد السلالات. 132 ، 133 يبدو أن الاحتفاظ بهذه الخلايا يعتمد على نشاط المجموعة c. 24، 134 لا يبدو أن CXCR4 يشارك فقط في تكوين الخلايا الجذعية والاحتفاظ بها: فقد ثبت أيضًا أنه مهم لبقاء هذه الخلايا وهدوئها على حد سواء. تمنع إضافة CXCL12 إلى الخلايا الجذعية المكونة للدم المستنبت دخولها إلى دورة الخلية ، وتخضع الخلايا الجذعية السلبية CXCR4 لتكاثر مستدام. 135 توسع هذه النتائج فهمنا الأصلي لتفاعل CXCR4 / CXCL12 من الذي يحتفظ بالخلايا الجذعية المكونة للدم في نخاع العظام لتشمل التحكم في دخولها إلى دورة الخلية.

4.1.4 الاتجار بالخلايا المناعية

بالإضافة إلى دور CXCR4 في إنشاء مكانة مكونة للدم ، يؤثر CXCR4 أيضًا على انتقال أسلاف المناعة والخلايا الناضجة. تمكّن إشارات CXCR4 الخلايا المناعية من الدوران في جميع أنحاء الجهاز اللمفاوي ، والتوجه إلى العقد الليمفاوية في سياق الالتهاب أو العدوى. 136 على سبيل المثال ، يتوسط CXCR4 توطين العدلات لتصريف الغدد الليمفاوية من الجلد الملتهب. 137 هذا يسهل تنشيط الاستجابة المناعية التكيفية في هذه الغدد الليمفاوية النازفة. تلعب إشارات 138 CXCR4 أيضًا دورًا في تهريب الخلايا المناعية التكيفية. 139 توجد نتائج مماثلة لخلايا أخرى في الجهاز المناعي الفطري: على سبيل المثال ، يعد تعبير CXCR4 ضروريًا لإعادة توطين الخلايا المتغصنة الجلدية خارج الجلد إلى العقد الليمفاوية المحلية أثناء الاستجابة المناعية. 139 في الفئران التي تعاني من نقص خلايا الكبد CXCR4 ، يتم اكتشاف الخلايا الحبيبية الناضجة وغير الناضجة في مستويات عالية بشكل غير طبيعي في الدم بينما يتم تقليلها في نخاع العظم ، مما يدل على دور تعبير CXCR4 في تثبيت الخلايا الحبيبية داخل مكانة نخاع العظم. 140

يشارك CXCR4 أيضًا في تثبيت تفاعل خلية تقديم مستضد الخلايا التائية (APC) ، تعمل ثنائيات CXCR4-CCR5 على تثبيت المشبك المناعي بين الخلايا الليمفاوية التائية و APC ، مما يسهل تنشيط الخلايا التائية. 141 ربما يكون أفضل تأثير مناعي مفهومة لإشارات CXCR4 هو تثبيت المشبك المناعي بين الخلايا التائية و APC وبالتالي تسهيل التحفيز المشترك للخلايا التائية وتفعيل الاستجابة المناعية التكيفية. 141 يحدث التحفيز المشترك لخلايا T بسبب إفراز كيميائي لـ APC CCL5 و CXCL12 مما يؤدي إلى إعادة توطين وتنشيط T-Cell CXCR4 و CCR5 في IS. تتوسط 142 بروتينات Gq / 11 في إشارات CXCR4 في IS ، مع تأثير تنظيمي مقترح بواسطة بروتين Drebrin المرتبط بـ F-actin. 143 يُقترح أن توطين المستقبلات للخلية التائية: واجهة APC قبل التنشيط بواسطة كيموكينات APC تضمن خصوصية تنشيط الخلايا التائية عن طريق تقليل التعرض للكيموكينات الأخرى في الوسط. 6

4.2 يمكن لإشارات CXCR4 أن تتوسط تأثيرات معاكسة داخل نظام فسيولوجي واحد

داخل نظام الدم ، يمكن أن يتوسط ربط CXCR4-CXCL12 إما استجابة fugetactic أو chemotactic في الكريات البيض. على سبيل المثال ، في نقي العظم ، يؤدي تفاعل CXCR4-CXCL12 إلى ربط الكريات البيض في نخاع العظم. تم العثور على الدليل على ذلك في متلازمة WHIM ، التي تسببها طفرة تنشيطية جسمية سائدة في CXCR4 ، وتتميز بقلة العدلات ونقص المناعة ، وتكوين الأعضاء المعيب ، وضعف تكوين الأوعية. 144 تؤدي طفرة WHIM إلى مجال غير طبيعي للطرف C لا يحتوي على مواقع الفسفرة المعتادة وبالتالي يضعف استيعاب المستقبلات وتوهين إشارات المستقبل. 144 ، 145 وهكذا ، فإن العدلات غير قادرة على مغادرة نخاع العظام وبالتالي المظهر السريري للمرض. في الوقت الحاضر ، هناك دراسة سريرية من المرحلة الثالثة جارية تبحث في مضاد CXCR4 AMD3100 باعتباره بيانات علاجية محتملة من هذه التجربة توفر أول دليل دوائي على أن قلة الكريات البيض في متلازمة WHIM ناتجة عن عزل الكريات البيض المعتمد على الإشارة CXCL12-CXCR4 وتصحيحه بواسطة AMD3100 الادارة. 146

علاوة على ذلك ، يعد تعبير CXCR4 ضروريًا للاحتفاظ بسلائف B-lineage داخل نخاع العظام وإيصال الخلايا B إلى الأعضاء اللمفاوية 147: في الفئران ذات خلايا الكبد التي تعاني من نقص CXCR4 ، يتم تقليل الخلايا الليمفاوية B الناضجة في الدم والأعضاء اللمفاوية أثناء وجودها هناك هي زيادة في سلائف الخلايا البائية في الدم. 140 علاوة على ذلك ، هناك انخفاض في توجيه الخلايا البائية إلى المنطقة الهامشية الطحالية والبصيلات الأولية. 148

في المقابل ، يتوسط تفاعل CXCR4-CXCL12 في الغدة الصعترية اندفاع الخلايا التائية. يتم التحكم في هجرة الخلايا الصعترية من الغدة الصعترية الجنينية إلى الأنسجة اللمفاوية الطرفية من خلال التفاعلات بين CXCL12 و CXCR4 و sphingosine 1-phosphate ومستقبلاته. 149 على عكس النخاع العظمي ، يؤدي تثبيط CXCR4 في الثيموكتيس بواسطة AMD3100 إلى الاحتفاظ بالخلايا التائية الناضجة في الغدة الصعترية وإضافة CXCL12 يؤدي إلى استجابة طاردة كيميائية من الخلايا التوتية الجنينية. 149 النتائج من نموذج CXCR4 بالضربة القاضية تشير إلى دور CXCR4 في تنظيم الهجرة التماثلية من thymoctyes حيث يعمل CXCL12 داخل الأعصاب بمثابة طارد كيميائي و sphingosine 1-phosphate يعمل كعامل جذب كيميائي. يوفر هذا الاكتشاف نظرة ثاقبة حول كيفية هجرة الكريات البيض الناضجة من الأعضاء التي تتطور فيها ، مع التركيز على التأثير الفسيولوجي للاندفاع وتسلط الضوء على كيف يؤدي ارتباط CXCR4-CXCL12 إلى تأثيرات معاكسة ، الاحتفاظ مقابل الانجذاب ، في نخاع العظم والغدة الصعترية ، على التوالي.

4.3 في حالة مرضية واحدة ، يمكن لإشارات CXCR4-CXCL12 أن تتوسط التأثير المعاكس

4.3.1 التئام الجروح

يلعب CXCR4 دورًا ثنائي الاتجاه في التئام الجروح. في جروح الفئران المصابة بداء السكري ، تضعف إشارات CXCR4 الشفاء. 150 بعد تطبيق موضعي واحد لمضاد CXCR4 AMD3100 ، تمت زيادة معدل التئام الجروح بآليتين متميزتين: زيادة عدد الخلايا السلفية الظهارية التي تم إطلاقها من نخاع العظم إلى الدورة الدموية الطرفية ، وزيادة نشاط مستقبل PDGFR ، PDGFR-B يتوسط في تجنيد الخلايا الليفية الجلدية إلى مواقع الإصابة. 150 تشير هذه الملاحظات إلى أنه من خلال زيادة نشاط الأوعية الدموية الجديدة والأرومة الليفية ، يزيد AMD3100 من التئام جروح الفئران المصابة بداء السكري. 150

في المقابل ، ترتبط إشارات CXCL12 / CXCR4 بشكل إيجابي بعملية الشفاء في دراسات كسر العظام داخل الغضروف. يعمل تنشيط CXCR4 على تعزيز هجرة الخلايا الجذعية الوسيطة للنخاع العظمي (MSCs) إلى موقع الكسر بطريقة تعتمد على الجرعة حيث تحث على إعادة تكوين النسيج الظهاري للجرح. 151 في الواقع ، يؤدي كل من الإلغاء الوراثي والدوائي لتعبير CXCR4 إلى إبطاء التئام الكسر عن طريق تقليل تسلل MSC إلى موقع الكسر. 151 لا يزال دور الخلايا الجذعية السرطانية في التئام العظام غير مؤكد ، وقد اقترحت الدراسات أنه يتم تجنيد الخلايا السلفية للنسيج الضام العظمي وخلايا أسلاف بانيات العظم المشتقة من نخاع العظم إلى موقع الكسر عبر محور CXCR4 / CXCL12. 152 ومن المثير للاهتمام أن دور هذا المحور في الإصلاح الطبيعي للعظام يظل بعيد المنال.

من المحتمل أن تكون المساهمات المتعارضة لمحور CXCR4 / CXCL12 للشفاء ناتجة عن البيئة الجزيئية المتميزة في موقع الإصابة والتي تؤثر على تنوع الترابط ، والشكل الإسوي للمستقبل ، وقلة القلة ، تنظم هذه العوامل بشكل تفاضلي مسارات إشارات المصب وتجعل CXCR4 / CXCL12 معقدًا. الهدف في سياق التئام الجروح.

4.3.2 مرض التهابي

علاوة على ذلك ، فإن دور إشارات CXCR4 في سياق المرض الالتهابي متباين بالمثل. على سبيل المثال ، في التهاب المفاصل الروماتويدي ، عبر تسلل الخلايا التائية في المفاصل عن مستويات أعلى من CXCR4 مقارنة بالخلايا التائية المنتشرة 153 و AMD3100 مما يؤدي إلى تراجع مرض التهاب المفاصل في نموذج الفأر لالتهاب المفاصل. 154 علاوة على ذلك ، في نموذج الفأر للذئبة الحمامية الجهازية (SLE) ، يتم تنظيم تعبير CXCR4 بشكل كبير في الخلايا البائية ، والخلايا الأحادية ، والعدلات ، ويؤدي الإفراط في التعبير عن CXCR4 مع CXCL12 إلى تسريع التسبب في مرض الذئبة الحمراء. 124 تمشيا مع هذه النتائج ، أدى إعطاء AMD3100 إلى تحسين حالة المرض. 124

وبالمثل ، فإن إشارات CXCR4 / CXCL12 تدفع النمط الظاهري للالتهاب السكري من النوع الأول. في البشر ، تم ربط عدد من أشكال CXCL12 بتطور داء السكري من النوع 1 155-157 في نموذج الفئران للمرض ، فإن تعبير CXCL12 مرتفع مقارنةً بالضوابط وإعطاء AMD3100 المتأخر في ظهور الالتهاب ومرض السكري ، 158 كما فعل إعطاء الأجسام المضادة ضد CXCR4 ، والتي أخرت ظهور مرض السكري لمدة 10 أسابيع وقللت من التهاب الانسولين. 159 يبدو أن هذا التأثير خاص بالتهاب البنكرياس ، حيث تقلل الأجسام المضادة لـ CXCL12 من التهاب الأنسولين دون الحد من التهاب الغدد اللعابية المناعي الذاتي في الفئران التي تصاب عادةً بمرض السكري ومتلازمة سجوجرن. 160

ومع ذلك ، في الفئران المصابة بداء السكري من النوع 1 المزروعة بخلايا جزيرة صحية ، كان دور إشارات CXCR4 / CXCL12 وقائيًا: تلك الخلايا الجزيرية المصممة لإنتاج تركيزات عالية من CXCL12 أدت إلى خواص كان لديها تسلل أقل للخلايا التائية المضيفة ، وزيادة بقاء الطعم الخيفي ، وخفض مستويات الجلوكوز في الدم ، 161 مما يشير مرة أخرى إلى الدور الذي يمكن أن يؤدي فيه CXCL12 إلى التوسط في التأثير الكيميائي النبضي بتركيزات عالية. علاوة على ذلك ، في الفئران المزروعة بخلايا مسببة للسكر تم خلطها مع AMD3100 ، زاد معدل الإصابة بمرض السكري في المتلقين مقارنةً بالضوابط. 162

تقدم هذه البيانات أدلة تدعم الدور المحتمل لـ CXCR4 / CXCL12 كحماية ضد تطور المناعة الذاتية. في الواقع ، هناك أدلة تشير إلى أن CXCL12 يمكنه تنظيم بيئة امتياز مناعي في جزر البنكرياس عن طريق تعديل الخلايا المناعية المتسللة نحو النمط الظاهري المضاد للالتهابات والمثبط للمناعة أثناء تجنيد الخلايا التائية التنظيمية و MSCs و HSCs. 163 في الواقع ، يمكن طلاء CXCL12 بمواد حيوية مثل الألجينات لتغليف الخلايا الجزيرية ، مما يمنع تفاعل الجسم الغريب الالتهابي الذي يمثل حدًا في زرع خلايا بيتا من أجل T1D. 164

علاوة على ذلك ، يحد تعبير CXCR4 من الالتهاب المرتبط بتصلب الشرايين من خلال تعزيز سلامة خلايا العضلات الملساء وتجنيد الخلايا السلفية بعد إصابة البطانة. يؤدي الحذف الجيني لـ CXCR4 في العضلات الملساء الشريانية أو الخلايا البطانية في الفئران المصابة بفرط شحميات الدم إلى زيادة لويحات تصلب الشرايين. يعتمد الحفاظ على وظيفة الحاجز البطاني على إشارات CXCL12 / CXCR4 التي تطلق إشارات Akt / WNT / B-catenin لدفع تعبير VE-cadherin. يؤدي تعطيل سلسلة الإشارات هذه عن طريق حذف CXCR4 إلى زيادة تجنيد كريات الدم البيضاء الالتهابية ، لا سيما توسيع محتوى العدلات في اللويحات ، ويعزز تصلب الشرايين. 165 ، 166

بعد تلف الأنسجة الناتجة عن تصلب الشرايين ، تطلق الخلايا البطانية أجسامًا أبوطوزية تحتوي على micro-RNA-126 الذي يثبط وظيفة منظم إشارات البروتين G 16 ، مما يزيد من إنتاج CXCL12. 167 يرتبط CXCL12 بالصفائح الدموية في موقع الإصابة مما يؤدي إلى توقف CXCR4 و P-selectin المعتمد على السلالات لتجديد خلايا العضلات الملساء neointimal. 168

في ضوء الأقسام التي تمت مناقشتها أعلاه ، من المهم مراعاة أن إشارات CXCL12 / CXCR4 يمكن أن تحدث تأثيرات معاكسة في كل من السياقات الفسيولوجية والفيزيولوجية المرضية. يجب أن يكون التدخل العلاجي الناجح على علم بالخصائص الدقيقة لسلسلة الإشارات هذه.

4.4 أنظمة الجرعات المختلفة تؤدي إلى استجابات علاجية مختلفة

تعتمد النتيجة العلاجية لعداء CXCR4 على نظام الدواء. على سبيل المثال ، أدى استخدام CTCE-0021 ، وهو ناهض CXCR4 ، إلى إطلاق الخلايا المكونة للدم في مجرى الدم. 169 تم تكرار هذا الاكتشاف في الفئران والقردة ، عندما وجد المؤلفون اختلافًا في الاستجابة الفسيولوجية لـ pepducin AT-2341 ، ناهض CXCR4 آخر ، يعتمد على طريقة الإعطاء: جرعة واحدة داخل الصفاق جندت العدلات متعددة الأشكال إلى الصفاق بطريقة من المتوقع حدوث استجابة كيميائية ، بينما أدى الإعطاء الوريدي الجهازي إلى إطلاق الخلايا الجذعية في دم الفئران والقرود. 54

علاوة على ذلك ، فقد تم اقتراح أن تكرار الجرعات هو مفتاح تعديل البيئة المناعية للورم من أجل زيادة قابلية الورم لعلاجات السرطان الموجودة. تشير الدلائل إلى أن الإدارة النابضة لـ AMD3100 تحسن من كبت الورم والبقاء على قيد الحياة بشكل عام ، مقارنة بالإعطاء المستمر. 170 على سبيل المثال ، جرعة وحدة مجمعة من AMD3100 ، تُعطى على مدى 7 أو 17 يومًا ، اعتمادًا على خصائص المريض والورم ، تمنع مستوى الانجذاب في الورم الصلب ، مما يوفر نافذة علاجية لعلاج الورم بشكل أكثر فعالية مع العلاجات التقليدية. 171 بالنظر إلى أن 85٪ من الأورام تعبر عن CXCL12 بتركيزات أعلى بما يكفي للتوسط في تأثير اندلاع كبير 171 على الخلايا المناعية في البيئة الدقيقة للورم ، فإن تثبيط CXCR4 النابض لديه القدرة على تحسين فعالية علاجات السرطان الحالية لمجموعة واسعة من الأورام الخبيثة.


الملخص

تعرض الوحدة الفرعية الحفزية لـ PKA (PKAc) ثلاث حالات توافق رئيسية (مفتوحة ومتوسطة ومغلقة) أثناء عملية التحفيز الحيوي. يمكن لكل من ATP والركيزة / المانع إحداث تغييرات توافقية لـ PKAc من الحالات المفتوحة إلى المغلقة. بهدف استكشاف آلية هذا التنظيم الخيفي ، قمنا بتطوير نموذج ذو حبيبات خشنة وقمنا بتحليل ديناميكيات التغييرات المطابقة لـ PKAc أثناء الربط عن طريق إجراء عمليات محاكاة الديناميات الجزيئية لـ apo PKAc ، PKAc ثنائي (PKAc مع ATP ، PKAc مع PKI) ، و PKAc الثلاثي (PKAc مع ATP و PKI). تشير نتائجنا إلى آلية ربط مختلطة للاختيار المطابق والملاءمة المستحثة ، مع سيطرة الملاءمة المستحثة. يمكن للروابط أن تقود حركات حلقة Gly-rich بالإضافة إلى بعض المناطق البعيدة عن الموقع النشط في PKAc وتثبيتها في حالة معقدة. بالإضافة إلى ذلك ، هناك مساران متوازيان (المسار مع PKAc-ATP باعتباره وسيطًا ومسار PKAc-PKI كوسيط) أثناء الانتقال من الحالة المفتوحة إلى الحالة المغلقة. من خلال محاكاة الديناميكيات الجزيئية والتحليلات الثابتة للمعدل ، نجد أن المسار عبر وسيط PKAc-ATP هو طريق الربط الرئيسي من الحالة المفتوحة إلى الحالة المغلقة نظرًا لحقيقة أن PKI المرتبط سيعوق ATP من الربط الناجح ويزيد بشكل كبير من الحاجز لـ عملية الربط الفرعية الثانية. ستوفر هذه النتائج رؤى أساسية لآليات التغيير المطابق لـ PKAc عند الإلزام.

Transferring of ATP terminal phosphates to target protein substrates, referred to as protein phosphorylation, by cAMP-dependent PKA is one of the most important biomolecular processes involved in many cellular activities, including metabolism, growth, memory, and cell differentiation (1, 2). PKA is one of the largest families in eukaryotes, widely spread in many species and many places. Thanks to the recent developments in structural biology, an arresting amount of structures of PKA, which mainly belongs to humans, mice, and pigs, has been well-solved and deposited into Protein Data Bank (PDB) (3 ⇓ ⇓ ⇓ ⇓ ⇓ ⇓ ⇓ –11). It greatly deepens our understanding on PKA’s biological regulation process through a conventional “structure–function” regime.

The inactive PKA is a holoenzyme composed of two regulatory (R) subunits, which provide the binding sites for cAMP, and two catalytic (C) subunits, which include the critical active and binding sites for ATP and substrates/inhibitors (12). The catalytic subunit of PKA (PKAc) is highly conserved both in sequence and structure. In general, the PKAcs have 350 residues, with two phosphorylation sites at Thr197 and Ser338 (denoted as pThr197 and pSer338). For 3D structure, PKAc comprises a kidney-shaped core (residue 40–300), which consists of a small N-terminal β -sheet dominated lobe (ATP binding site residue 40–119), a large helical-rich lobe (substrate/inhibitor binding site residue 128–300), and the linker between them (residue 120–127) (12) (Fig. 1). The intrinsic dynamics of PKAc, which is mostly contributed by opening and closing the active site cleft, is found to be prevalent and critical to its regulation function (12). However, because of the highly dynamic characteristics, the structure of PKAc is elusive. The first crystallographic structure of PKAc was successfully solved by Knighton et al. (7) via cocrystalizing a high-affinity protein binding inhibitor (PKI), a 20-aa peptide of heat stable protein, including a high-affinity pseudosubstarte region and a nuclear export signal (13). The PKAc dynamics are found to be quenched by the high-affinity binding interactions from PKI, making the structure of PKAc accessible (14, 15). Additional experiments revealed that the binding affinity of ATP and PKI will be cooperatively enhanced by each other. The high affinity between PKI and PKAc-ATP will block substrate binding, supporting the evidence of PKI serving as an inhibitor for PKAc (16, 17).

(أ) PKAc structure and (يكون) the free energy landscapes of PKAc dynamics along critical distances between Ser53 and Gly186 (x axis) and Ser53 and Asp166 (ذ axis) in different systems [(ب) apo PKAc (apo), (ج) PKAc-ATP (binary-ATP), (د) PKAc-PKI (binary-PKI), and (ه) PKAc-ATP-PKI (ternary)]. PDB ID code 1ATP is illustrated as the PKAc-ATP-PKI ternary complex. Ligand ATP is shown as spheres (between small and large lobes of PKAc), and ligand PKI is shown as purple cartoons. For PKAc, small lobe (40–119), large lobe (128–300), and linker (120–127) are shown as red, light orange, and blue cartoons, respectively. Glycine-rich loop (46–57 colored in yellow) belongs to small lobe, and catalytic loop (116–171) and Mg-positioning loop (both colored in green) belong to large lobe. Three main distances of six residue pairs (Ser53-Gly186, His87-Thr197, and Glu170-Tyr330), which are used to distinguish different states of PKAc, are labeled in أ. The classification of open, closed, and intermediate states is referred to the data in the work of Masterson et al. (15).

Structural investigations revealed that PKAc populates at three main conformations, which can be classified into open, closed, and intermediate states based on the conformation of active site cleft (12, 14, 15, 18). ال apo PKAc dominates at open state (dynamically uncommitted to catalysis), with minor populations at other states, while the presence of ligand (nucleotide or substrate/inhibitor) alters this conformational equilibrium to favor the intermediate or closed states (dynamically committed) (14, 15). During the binding process, the conformational changes of PKAc mostly occur in the Gly-rich loop, between the catalytic and peptide-positioning loops, and in the C-terminal portion (18). In practice, people have pointed out some critical distances as the criteria to classify the different states of PKAc, such as the distance between α carbon atom (CA) of Ser53 and CA of Gly186 (measuring the opening and closing of the Gly-rich loop), the distance between NE2 of His87 and phosphate oxygen of phospho-Thr197 (measuring the position of C helix relative to the large lobe), and the distance between O of Glu170 and OH of Tyr330 (measuring the distance of the C-terminal tail to the active site) (12, 19).

Based on the abundant static structures (bound states) of PKAc, additional insights are moving to understand the relationship between conformation and function by uncovering the conformational dynamics of PKAc during binding. Recently, NMR-based investigations by Masterson et al. (14, 15) portrayed an energy landscape of PKAc binding with substrate phospholamban (PLN) and inhibitor PKI. Different binding partners have different effects on the conformational dynamics of PKAc, manipulating the regulation process through a delicate circulation of dynamically committed, uncommitted, and quenched states. In addition, Hyeon et al. (20) described the process of binding-induced conformational changes of PKAc by ATP through a coarse-grained molecular simulations. Because of the high flexibility and associated underlying free energy landscape, it is valuable to investigate the PKAc systems with computational methods (15, 20 ⇓ ⇓ ⇓ ⇓ ⇓ ⇓ ⇓ –28). However, fully understanding the process of intrinsic dynamics and binding-induced conformational change of PKAc, in particular accomplished by a complete biomolecular process with binding of two ligands, is still challenging because of the complexity of underlying free energy landscapes and large numbers of elements of the system. Here, we developed a coarse-grained model for PKAc systems (apo, PKAc-ATP, and PKAc-PKI binary complexes and PKAc-ATP-PKI ternary complex). With quantified thermodynamic binding energy landscape and kinetics, we show dynamic conformational changes occurring in PKAc and address the critical residues during the binding process in different PKAc systems. Our results provide a comprehensive way to understand the molecular mechanism of the PKAc family by using a “structure–dynamics–function” framework, which makes important contributions to understanding the biological mechanism of PKAc family.


الملخص

The chirality of biomolecules is vital importance in biosensing and biomedicine. However, most biomolecules only have a chiral response in the ultraviolet region, and the corresponding chiral signal is weak. In recent years, inorganic nanomaterials can adjust chiral light signals to the visible and near-infrared regions and enhance optical signals due to their high polarizability and adjustable morphology-dependent optical properties. Nonetheless, inorganic nanomaterials usually lack specificity to identify targets, and have strong toxicity when applied in organisms. The combination of chiral biomolecules and inorganic nanomaterials offers a way to solve these problems. Because chiral biomolecules, such as DNA, amino acids, and peptides, have programmability, specific recognition, excellent biocompatibility, and strong binding force to inorganic nanomaterials. Biomolecule-mediated chiral nanostructures show specific recognition of targets, extremely low biological toxicity and adjustable optical activity by regulating, assembling and inducing inorganic nanomaterials. Therefore, biomolecule-mediated chiral nanostructures have received widespread attention, including chiral biosensing, enantiomers recognition and separation, biological diagnosis and treatment, chiral catalysis, and circular polarization of chiral metamaterials. This review mainly introduces the three chiral mechanisms of biomolecule-mediated chiral nanostructures, lists some important applications at present, and discusses the development prospects of biomolecule-mediated chiral nanostructures.


الانتماءات

Dipartimento di Chimica, Università degli Studi di Bari, Aldo Moro - Bari, Italy

Eleonora Macchia, Kyriaki Manoli, Maria Magliulo, Gerardo Palazzo & Luisa Torsi

Dipartimento Interateneo di Fisica “M. Merlin” dell’Università e del Politecnico di Bari, Bari, Italy

Domenico Alberga & Francesco Giordano

Dipartimento di Farmacia – Scienze del Farmaco, Università degli Studi di Bari, Aldo Moro - Bari, Italy

Dipartimento di Medicina Clinica e Sperimentale –Università degli Studi di Foggia, Foggia, Italy


شاهد الفيديو: طرق فصل وتنقية البروتينات (قد 2022).


تعليقات:

  1. Faehn

    قراءة ديفو أيضا

  2. Tavish

    لا يمكنني المشاركة في المناقشة الآن - أنا مشغول جدًا. لكنني سأعود - سأكتب بالتأكيد ما أعتقد.

  3. Talbert

    في ماذا تفكر؟

  4. Samujas

    أعتقد أنهم مخطئون. أقترح مناقشته. اكتب لي في رئيس الوزراء ، يتحدث إليك.

  5. Nishakar

    السؤال الترفيهي



اكتب رسالة